(3)模型方程的建立與顯著(zhù)性檢驗
根據多元回歸分析擬合試驗結果(表4和表5)可得到:
苦養蛋白得率(Y1)的二次回歸方程:
Y1=7.85+0.48A+0.35B+0.28C—0.27AB+0.058AC+0.34BC—1.15A2一1.81B2一1.67C2;
苦養黃酮得率(Y2)的二次回歸方程:
Y2=1.13+0.073A+0.068B+0.15C+0.19AB—0.010AC—0.12BC—0.28A2一0.16B2—0.13C2,
并進(jìn)行方差分析。
由方差分析可知,回歸模型極顯著(zhù)(p<0.0001),提取苦蕎蛋白方程失擬項為0.5607>0.05;提取黃酮的失擬項為0.0894>0.05,二者都表明失擬項不顯著(zhù),且苦養蛋白的R2=0.9845,R2Adi=0.9646; 黃酮的R2=0.9829,R2Adi=0.9610,表明該模型與實(shí)際值擬合性很好,可以利用二者的回歸方程確定苦蕎蛋白和黃酮類(lèi)物質(zhì)的最佳提取工藝條件。根據回歸模型的方差分析也表明對苦養蛋白影響極顯著(zhù)的因素有A(粒度)、A2、B2、C2,影響顯著(zhù)的因素有B(pH)、C(溫度),AB、AC、BC的交互影響均不顯著(zhù)。對苦養黃酮類(lèi)化合物影響極顯著(zhù)的是C(溫度)、A2、B2,影響顯著(zhù)的有AB、AC的交互作用,A(粒度)、B(pH)、BC、C2影響不顯著(zhù)。從單因素水平分析可以得出,各個(gè)因素對苦蕎蛋白影響的主次順序為粒度>pH>溫度,對苦養黃酮影響的主次順序為溫度>粒度>pH。
(4)響應面分析
依照Box—Behnken中心組合設計原理和試驗數據得出的各因素間的交互作用如圖6和圖7,根據圖6和圖7的響應面圖及等高線(xiàn)圖能夠比較直觀(guān)地反應各個(gè)因素之間的交互作用及其對響應值的影響。從各因素之間交互的圖形可以看出各因素間交互作用的強弱,其中曲線(xiàn)走勢越陡說(shuō)明其影響越顯著(zhù);曲線(xiàn)走勢越平滑說(shuō)明其影響越小。提取苦蕎黃酮和蛋白的響應面都存在極值,即響應面有最高點(diǎn)峰值。通過(guò)分析可知,當粉碎粒度為63.60目,pH為9.15,提取溫度為67.26℃,液料比為30∶1mL/g,超聲時(shí)間為40min時(shí)為超聲同步提取苦蕎蛋白和黃酮類(lèi)化合物的最佳提取工藝條件?;貧w模型預測理論中蛋白得率為7.90%,黃酮得率為1.17%。對結果進(jìn)行驗證性實(shí)驗,考慮到實(shí)際操作的可行性,將苦蕎蛋白和黃酮類(lèi)化合物的最佳同步提取工藝條件修正為:液料比為30∶1mL/g,超聲時(shí)間為40min,粉碎粒度為60目,pH為9.15,提取溫度為67.2℃,在此條工藝條件下進(jìn)行超聲輔助苦蕎蛋白和黃酮的同步提取。
(5)驗證試驗
在粉碎粒度為60目,pH為9.15,超聲時(shí)間為40min,提取溫度為67.2℃,液料比為30∶1mL/g工藝條件下重復提取三次,得到苦蕎蛋白得率為7.79%,苦蕎黃酮得率為1.14%。驗證試驗結果與模型的預測值相吻合,表明模型可靠,適用于苦蕎蛋白和黃酮類(lèi)物質(zhì)的同步提取。
三、結論
本試驗通過(guò)響應面法確定超聲輔助苦蕎中蕎麥蛋白和黃酮類(lèi)化合物的最佳同步提取條件為:
液料比為30∶1mL/g,超聲時(shí)間為40min,粉碎粒度為60目,pH為9.15,提取溫度為67.2℃。
在此工藝條件下苦蕎蛋白得率為7.79%,苦蕎黃酮得率為1.14%。為蛋白和黃酮類(lèi)化合物的同步提取研究提供了一定的理論依據,為苦蕎麥產(chǎn)品的研發(fā)提供新的途徑和技術(shù)支撐。
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